針對(duì)癌細(xì)胞中FEN1活性低兵罢、難以檢測(cè)的問(wèn)題烫扼,東北師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院的楊麗教授研究團(tuán)隊(duì)近日提出了一種創(chuàng)新性的傳感方法。該方法結(jié)合了化學(xué)發(fā)光光纖傳感器(COFSs)與無(wú)酶雜交鏈反應(yīng)(HCR)核酸擴(kuò)增策略牌借,實(shí)現(xiàn)了對(duì)HeLa細(xì)胞中FEN1的高靈敏檢測(cè)度气。相關(guān)研究以《雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)化學(xué)發(fā)光光纖生物傳感器對(duì)皮瓣內(nèi)切酶 1 的超靈敏檢測(cè)》(“Ultrasensitive detection of flap endonuclease 1 using a chemiluminescence optical fiber biosensor with hybridization chain reaction”)為題,已在英國(guó)皇家化學(xué)會(huì)的sensors & Diagnostics期刊上發(fā)表膨报。這一突破性的研究為癌癥診斷和治療提供了新的有力工具磷籍。
該圖示方法首先運(yùn)用磁分離技術(shù),成功分離出由FEN1切割分叉結(jié)構(gòu)雙鏈DNA所產(chǎn)生的短鏈DNA(即5'-flap)现柠。為特異性捕獲5'-flap院领,采用硅烷化反應(yīng)將發(fā)夾探針修飾在光纖傳感區(qū)表面。一旦光纖傳感區(qū)捕獲到5'-flap够吩,發(fā)夾探針將打開(kāi)比然,并作為引發(fā)劑觸發(fā)由生物素修飾的H1和H2級(jí)聯(lián)反應(yīng),進(jìn)而實(shí)現(xiàn)HCR擴(kuò)增废恋。
HCR擴(kuò)增過(guò)程導(dǎo)致光纖傳感區(qū)表面產(chǎn)生大量的生物素結(jié)合位點(diǎn)谈秫。借助生物素與鏈霉親和素之間的特異性結(jié)合,引入了鏈霉親和素修飾的辣根過(guò)氧化物酶(SA-HRP)鱼鼓。最終拟烫,通過(guò)催化化學(xué)發(fā)光底物,實(shí)現(xiàn)了對(duì)FEN1的高靈敏度監(jiān)測(cè)迄本。
如圖所展示的光纖傳感器裝置硕淑,經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì)與開(kāi)發(fā),展現(xiàn)出卓越的分析性能嘉赎。其對(duì)FEN1的檢測(cè)線性范圍廣泛置媳,涵蓋10 fM至75 pM,且檢測(cè)限低至3.4 fM公条,顯示出極高的靈敏度拇囊。此外,該裝置還成功應(yīng)用于HeLa細(xì)胞裂解液中FEN1的測(cè)定靶橱,其所得結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)的ELISA法相一致寥袭,驗(yàn)證了其準(zhǔn)確性和可靠性路捧。這一成果為FEN1的定量檢測(cè)提供了新的有力工具。
論文鏈接:https://doi.org/10.1039/D3SD00230F