國產(chǎn)全自動化學(xué)發(fā)光新技術(shù)周偎，助力HCV精準(zhǔn)檢測
- 2023 - 12 - 05
國際知名期刊Frontiers in Cellular and Infection Microbiology雜志（IF=5.7）在11月27號刊登了一篇由上海公共衛(wèi)生臨床中心河狐、北京大學(xué)第三醫(yī)院稳析、北京大學(xué)人民醫(yī)院北京大學(xué)肝病研究所聯(lián)合署名的研究論文酝润，“A new double-antigen sandwich test based on the light-initiated chemiluminescent assay for detecting anti-hepatitis C virus antibodies with high sensitivity and specificity”祟绊。該論文介紹了一種新型的雙抗原夾心法檢測丙型肝炎病毒抗體的高靈敏度楼入、高特異度的新方法，該方法基于光激化學(xué)發(fā)光技術(shù)實(shí)現(xiàn)牧抽。
研究顯示嘉熊，LiCA?Anti-HCV是一種高度準(zhǔn)確、具有超高靈敏度和特異度的全自動化學(xué)發(fā)光檢測方法扬舒，它是一種非常有價值的工具阐肤，可用于輔助診斷HCV感染。
通過上海公衛(wèi)、北醫(yī)三院孕惜、北大人民肝病研究所臨床檢驗(yàn)中心超大臨床樣本（n=16,305）愧薛、多角度（靈敏度、特異性衫画、HCV亞型毫炉、基因型和血清轉(zhuǎn)換盤、精密度削罩、23種交叉反應(yīng)和干擾物瞄勾、9種血漿與血清一致性、機(jī)載穩(wěn)定性弥激、試劑批間差进陡、儀器臺間差等）多中心臨床研究評價，與Architect anti-HCV雙盲比對微服，用RIBA和HCV RNA進(jìn)行結(jié)果確認(rèn)趾疚，科學(xué)、全面地評估了LiCA?Anti-HCV檢測性能以蕴。
研究數(shù)據(jù)結(jié)果
與Architect?相比糙麦，LiCA? Anti-HCV在靈敏度、特異性舒裤、準(zhǔn)確度上表現(xiàn)明顯更好喳资。特異性（99.91% VS. 99.14%，n=16,018）腾供；陽性預(yù)測值（95.29% VS. 67.06%仆邓，n=419，P＜0.0001）伴鳖；總體準(zhǔn)確性（99.90% VS. 99.12%节值，n=16,305，P＜0.0001）榜聂。
對于LiCA? 與Architect?檢測不一致的樣本47例（0.28%, n=16,305）采用RIBA和HCV RNA確認(rèn)搞疗，46/47例為Architect?假陽性，1/47為Architect?假陰性须肆。
在239份HCV 1-6亞型樣本中匿乃，LiCA? Anti-HCV全部正確檢出所有病例。
對于HCV感染早期檢測豌汇，LiCA? 擁有比Architect?更高的靈敏度幢炸。LiCA? 的檢測窗口期明顯更短，比Architect?早3.7天（P=0.0056）拒贱。
在29個市售枸櫞酸鈉血清轉(zhuǎn)化盤評估HCV感染的早期檢測能力結(jié)果宛徊，14個血清盤LiCA?比Architect?更早檢測到血清學(xué)轉(zhuǎn)化（平均-8.8天）佛嬉，只有3個盤LiCA?比Architect?晚檢出（平均+5.3天），另外12個盤檢出時間相同闸天。
LiCA? Anti-HCV擁有高靈敏度和高特異性的優(yōu)勢可以歸因于其采用的方法學(xué)暖呕。
LiCA?采用兩種納米級微球（鏈霉親和素包被的感光珠與重組病毒抗原包被的發(fā)光珠）和生物素標(biāo)記的抗原，通過生物素-鏈霉親和素模式苞氮，完成一步法雙抗原夾心免疫反應(yīng)湾揽。
如果樣本中存在HCV抗體，孵育后可形成免疫復(fù)合物葱淳。感光球和發(fā)光球通過抗體-抗原結(jié)合反應(yīng)鏈接在一起钝腺，導(dǎo)致兩者之間的距離<200 nm抛姑，感光球產(chǎn)生的單線態(tài)氧可以擴(kuò)散到發(fā)光球從而產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光赞厕。
當(dāng)樣本中不含HCV抗體，不會發(fā)生免疫結(jié)合反應(yīng)定硝，感光球和發(fā)光球之間的距離>200 nm皿桑，單線態(tài)氧分子無法完成遷移，因此不產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光蔬啡。
正因?yàn)檫@種獨(dú)特的方法學(xué)原理诲侮，LiCA?檢測不需要任何洗滌步驟來分離免疫復(fù)合物與游離成分，也不會產(chǎn)生干擾信號影響結(jié)果箱蟆。不像傳統(tǒng)免疫反應(yīng)沟绪，如洗滌不干凈，則會產(chǎn)生干擾信號空猜。
該研究中的LiCA?Anti-HCV檢測基于雙抗原夾心反應(yīng)原理绽慈，兩種水平的抗原特異性鉗夾抗體，使非特異性結(jié)合可以減少到最低限度辈毯。夾心法的另一個優(yōu)點(diǎn)是可提高對新發(fā)感染者體內(nèi)產(chǎn)生的Anti-HCV IgM抗體的檢出能力坝疼，而間接法是不能識別這些IgM類抗體的。
LiCA?方法采用的納米級微球擁有更大的比表面積谆沃，其生物素-鏈霉親和素機(jī)制可放大反應(yīng)信號钝凶，這些因素也可提升檢測靈敏度。最近的研究表明唁影，LiCA?方法在檢測促甲狀腺素耕陷、心肌肌鈣蛋白和新冠抗原等方面，具有優(yōu)異的檢出能力据沈。
除了優(yōu)異的靈敏度和特異性哟沫，LiCA?抗-HCV在日間、不同試劑批號卓舵、不同儀器和樣品基質(zhì)中均表現(xiàn)良好的分析精密度和穩(wěn)定性南用。此外，該檢測采用均相免疫反應(yīng)，無需清洗裹虫，無人值守式全自動運(yùn)行肿嘲，在靈活性、生產(chǎn)率和成本效益方面具有優(yōu)勢筑公，可適應(yīng)不同的需求場景雳窟，助力在全球范圍內(nèi)消滅HCV的終極目標(biāo)。
高靈敏度和高特異性對于保證臨床初篩結(jié)果的準(zhǔn)確性匣屡，尤其在低收入地區(qū)簡化確認(rèn)實(shí)驗(yàn)流程封救、減少誤診，具有高敏感性和高特異性的可靠的篩查試驗(yàn)是至關(guān)重要的捣作，從而為保證WHO 2030年消滅丙肝的目標(biāo)實(shí)現(xiàn)提供堅(jiān)實(shí)的初篩實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)誉结。
文獻(xiàn)信息：Frontiers | A new double-antigen sandwich test based on the light-initiated chemiluminescent assay for detecting anti-hepatitis C virus antibodies with high sensitivity and specificity (frontiersin.org)